KRAS/BRAF基因突变检测

1、临床意义

      KRAS基因是人体肿瘤中常见的致癌基因之一。该基因的突变多见于多种恶性肿瘤，在肺癌患者中的突变率约为15~30%，在结直肠癌患者中的突变率约为20~50%。临床研究表明，KRAS基因突变状态与非小细胞肺癌对吉非替尼、厄罗替尼等靶向治疗药物的原发性耐药相关，直肠癌症患者中KRAS的突变对西妥昔单抗等药物的耐药性有关。
      KRAS基因突变的转移性结直肠患者对西妥昔、帕尼单抗等EGFR靶向治疗药物产生耐药，根据检测结果决定是否使用EGFR靶向药物作为临床治疗措施。目前，KRAS基因检测已被欧美地区列为大肠癌患者内科治疗前必做的常规检查。KRAS基因突变检测已被美国癌症综合网络（NCCN）的《NCCN结肠癌临床实践指南》与《NCCN直肠癌临床实践指南》列为临床用药必检项目。因此，KRAS突变对西妥昔单抗、帕尼单抗在结直肠癌患者的治疗具有重要的指导意义。

      BRAF 绝大部分突变形式为BRAF V600E 突变，主要发生于黑色素瘤、结肠癌和甲状腺癌中。在结直肠癌患者中，BRAF基因突变率为15%，在使用爱必妥或帕尼单抗等靶向药物时，须检测肿瘤组织KRAS基因状态，如果KRAS无突变，应考虑检测BRAF基因状态。在黑色素瘤患者的治疗方面，BRAF基因在原发性黑色素瘤中突变率为80%、在转移性黑色素瘤中突变率为68%、在良性痣中的突变率高达82%。
      目前，BRAF基因检测已被欧美地区列为大肠癌患者治疗前必做的常规检查。针对BRAF基因突变所研发的新型靶向药物威罗菲尼对于BRAF基因突变阳性患者疗效显著。人类BRAF基因V600E突变基因检测对于指导治疗结肠癌、黑色素瘤患者具有非常重要的意义。

2、检测服务描述

      本检测服务基于多重PCR技术和毛细管电泳相结合的方法对KRAS和BRAF基因进行快速、准确、高效的检测。在一个PCR反应中对两个基因的相关位点进行PCR扩增，然后根据扩增片段大小不同，经毛细管电泳分离得出检测结果。

3、技术优势
      高通量：一个反应可检测多达160个基因突变，扩大靶向药物相关基因检测空间。
      高特异性：特殊的PCR引物设计、优化的PCR反应条件，保证突变基因的特异性扩增。此外，我们选择中国人群中突变频率较高的几十个致病突变进行检测，使检测更具针对性。
      高效率：相同检测时间，效率提高8倍以上。
      高精确度：精确至一个碱基差别的分辨率，得以精准区分各种基因突变。
      高灵敏度：能达到与荧光定量PCR同等的灵敏度。
      低成本：高检测通量保证低检测费用，适用于更大的消费者群体。

4、适用机型

      ABI3500、常规PCR仪。

5、样本类型及要求

      石蜡组织切片10μm厚度3-5片，DNA样本浓度50ng/μl，OD值260/280值在1.8-2.0之间，无明显降解，无RNA污染。

6、检测流程

7、检测周期